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SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段,电泳法)图片
产品货号:
BTN13-81930y
中文名称:
SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段,电泳法)
英文名称:
SARS-CoV-2 Orf1ab-N RT-PCR Kit
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒根据PCR原理开发,用于体外定性检测人鼻咽拭子、痰液及肺泡灌洗液中的新型冠状病毒的Orf1ab-N片段,仅作为应对SARS-CoV-2感染的肺炎疫情期间的体外诊断应急使用。在使用上应遵守《中国CDC新冠肺炎实验室检测技术指南》、《新型冠状病毒感染的肺炎防控方案》等文件(现行版)的相关要求。可用于科研领域快速检测SARS-CoV-2。

试剂盒特点:
1.一站式,用户不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2.根据2019新型冠状病毒的Orf1ab-N片段序列设计的引物,具有良好的特异性。
3.灵敏度可以达到1000拷贝/反应。
4.使用一管式RT-PCR技术,RT和PCR两步在一个试管内完成,不需要中间转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5.本产品足够50次20μL体系的RT-PCR。
6.本产品只能用于科研,不能用于临床。

试剂盒组成:
组分规格
5×RT-PCR Buffer200μL
MMLV-Taq Mix75μL
超纯水1mL
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR引物混合液
100μL
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR阳性对照(1×108拷贝/μL)
50μL

保存条件:-20℃保存,保存期限为一年。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置,因为其容易污染其他成分,造成假阳性。

使用方法:

一、样品RNA的制备
1.用自选方法纯化样品RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容,可以选购本公司的柱式病毒RNA提取试剂盒(BTN71001)。
2.如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL SARS-CoV-2冠状病毒Orf1ab-N片段RT-PCR阳性对照的10000倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品RNA。

二、设置RT-PCR反应(20μL体系)
3.如果有N+2个样品,则标记N+4个PCR管(额外增加的两个管一个是RT-PCR阳性对照,另一个是RT-PCR阴性对照)并按照下表在PCR管中加入下列成分:
成分N+2个
样品管
RT-PCR
阴性对照
RT-PCR
阳性对照
5×RT-PCR Buffer各4μL4μL4μL
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR引物混合液
各2μL2μL2μL
N+2个制备的RNA样品各12.5μL--
超纯水-12.5μL-
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR阳性对照10000倍稀释液
--12.5μL
MMLV-Taq Mix各1.5μL1.5μL1.5μL

4.上机进行RT-PCR,RT-PCR反应参数为:
过程温度时间
逆转录42℃30min
预变性95℃5min
PCR反应(35个循环)95℃30sec
53℃20sec
72℃20sec
延伸72℃7min


三、结果判定
5.琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物,则说明实验失败,需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照有预期扩增产物的情况下,才有必要分析样品的实验结果,如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性,如果无则为阴性。
相关搜索:SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段,电泳法)新型冠状病毒试剂盒新冠病毒试剂盒SARS-CoV-2 Orf1ab-N RT-PCR Kit
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