产品货号：
BTN13-81930y
中文名称：
SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段，电泳法)
英文名称：
SARS-CoV-2 Orf1ab-N RT-PCR Kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒根据PCR原理开发，用于体外定性检测人鼻咽拭子、痰液及肺泡灌洗液中的新型冠状病毒的Orf1ab-N片段，仅作为应对SARS-CoV-2感染的肺炎疫情期间的体外诊断应急使用。在使用上应遵守《中国CDC新冠肺炎实验室检测技术指南》、《新型冠状病毒感染的肺炎防控方案》等文件（现行版）的相关要求。可用于科研领域快速检测SARS-CoV-2。
试剂盒特点：
1．一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2．根据2019新型冠状病毒的Orf1ab-N片段序列设计的引物，具有良好的特异性。
3．灵敏度可以达到1000拷贝/反应。
4．使用一管式RT-PCR技术，RT和PCR两步在一个试管内完成，不需要中间转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5．本产品足够50次20μL体系的RT-PCR。
6．本产品只能用于科研，不能用于临床。
试剂盒组成：
保存条件：-20℃保存，保存期限为一年。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。
使用方法：
一、样品RNA的制备
1．用自选方法纯化样品RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容，可以选购本公司的柱式病毒RNA提取试剂盒(BTN71001)。
2．如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL SARS-CoV-2冠状病毒Orf1ab-N片段RT-PCR阳性对照的10000倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品RNA。
二、设置RT-PCR反应（20μL体系）
3．如果有N+2个样品，则标记N+4个PCR管（额外增加的两个管一个是RT-PCR阳性对照，另一个是RT-PCR阴性对照）并按照下表在PCR管中加入下列成分：
4．上机进行RT-PCR，RT-PCR反应参数为：
三、结果判定
5．琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物，则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照有预期扩增产物的情况下，才有必要分析样品的实验结果，如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。
相关搜索：SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段，电泳法)，新型冠状病毒试剂盒，新冠病毒试剂盒，SARS-CoV-2 Orf1ab-N RT-PCR Kit
试剂盒特点：
1．一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2．根据2019新型冠状病毒的Orf1ab-N片段序列设计的引物，具有良好的特异性。
3．灵敏度可以达到1000拷贝/反应。
4．使用一管式RT-PCR技术，RT和PCR两步在一个试管内完成，不需要中间转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5．本产品足够50次20μL体系的RT-PCR。
6．本产品只能用于科研，不能用于临床。
试剂盒组成：
| 组分 | 规格 |
| 5×RT-PCR Buffer | 200μL |
| MMLV-Taq Mix | 75μL |
| 超纯水 | 1mL |
| SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段 RT-PCR引物混合液 | 100μL |
| SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段 RT-PCR阳性对照(1×108拷贝/μL) | 50μL |
保存条件：-20℃保存，保存期限为一年。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。
使用方法：
一、样品RNA的制备
1．用自选方法纯化样品RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容，可以选购本公司的柱式病毒RNA提取试剂盒(BTN71001)。
2．如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL SARS-CoV-2冠状病毒Orf1ab-N片段RT-PCR阳性对照的10000倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品RNA。
二、设置RT-PCR反应（20μL体系）
3．如果有N+2个样品，则标记N+4个PCR管（额外增加的两个管一个是RT-PCR阳性对照，另一个是RT-PCR阴性对照）并按照下表在PCR管中加入下列成分：
| 成分 | N+2个 样品管 | RT-PCR 阴性对照 | RT-PCR 阳性对照 |
| 5×RT-PCR Buffer | 各4μL | 4μL | 4μL |
| SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段 RT-PCR引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个制备的RNA样品 | 各12.5μL | - | - |
| 超纯水 | - | 12.5μL | - |
| SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段 RT-PCR阳性对照10000倍稀释液 | - | - | 12.5μL |
| MMLV-Taq Mix | 各1.5μL | 1.5μL | 1.5μL |
4．上机进行RT-PCR，RT-PCR反应参数为：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 42℃ | 30min |
| 预变性 | 95℃ | 5min |
| PCR反应（35个循环） | 95℃ | 30sec |
| 53℃ | 20sec | |
| 72℃ | 20sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7min |
三、结果判定
5．琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物，则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照有预期扩增产物的情况下，才有必要分析样品的实验结果，如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。
相关搜索：SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段，电泳法)，新型冠状病毒试剂盒，新冠病毒试剂盒，SARS-CoV-2 Orf1ab-N RT-PCR Kit